抗肾小球基底膜抗体测定(AGBM)
抗肾小球基底膜抗体是由肾小球毛细血管内外透明层及中间致密层构成的网状结构,以糖蛋白为主体。
检测GBM抗体的最常用方法是以肾脏组织为抗原的IIF法(间接免疫荧光法),其荧光特点是在肾小球基底膜处显示典型的花瓣状、或斑点状、颗粒状着染。IIF法可出现假阳性结果。以胶原酶消化过的GBM粗制品为抗原的ELISA、放射免疫法也可用,其敏感度和特异性依赖抗原的纯度。临床上常用间接免疫荧光法等检出。
间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。
第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。
第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。
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临床意义
阳性:抗GBM抗体阳性病人占自身免疫性肾炎的5%,在肾小球性肾炎、咳血综合征患者中有80%的阳性检出率,半月体形成性肾小球肾炎患者中有20%~70%的阳性检出率,也可在增殖性肾炎中检出。
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